维c加二氯靛酚钠为什么颜色消失

❶ 维生素C的测定中二氯靛酚有什么作用

二氯靛酚钠盐的水溶液显蓝色，在酸性环境中玫瑰色，当被还原时为无色。在酸性环境中测定VC时，VC可将二氯靛酚还原为无色，当VC全部被氧化时，二氯靛酚不再被还原而呈玫瑰色。表明此时到达滴定终点。所以它相当于指示剂的作用。

❷ 2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量有何优缺点

优点：该法简便易行、快速，目前仍被广泛运用。

缺点：2,6-二氯靛酚在滴定深色蔬菜时，受到颜色的干扰，终点的判断很难判断，从而造成分析误差。

用2％草酸制备提取液，可有效地抑制抗坏血酸氧化酶，以免抗坏血酸变为氧化型而无法滴定，而1％的草酸无此作用。如样品中有较多亚铁离子（Fe2+）时，也可使染料还原而影响测定，这时应改用8％乙酸代替草酸制备样品提取液，此时Fe2+不会很快与染料起作用。

(2)维c加二氯靛酚钠为什么颜色消失扩展阅读：

选用酸价值较高的样品，分别用自动电位滴定法和人工滴定法平行测定5次，自动电位滴定法测定的相对标准偏差1.1%，人工滴定法为1.6%；平行测定酸价值较低的样品5次，自动电位滴定法测定的相对偏差为2.1%，而人工滴定法的相对标准偏差高达11.4%，表明自动电位滴定法的精密度优于人工滴定法。

❸ 维生素c含量的测定的实验报告 用2,6-二氯靛酚法

一、目的及原理
天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种,还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇（COH=COH）存在,故为一种极敏感的还原剂,它可失去两原子氢而氧化为脱氢型抗坏血酸.染料2.6―二氯靛酚钠盐（C12H6O2NCl2Na）作为氧化剂,可以氧化抗坏血酸而其体身亦被还原成无色的衍生物.
2.6―二氯靛酚钠盐易溶于水,其碱性或中性水溶液呈蓝色,在酸性溶液中成桃红色,这个变化用来鉴别滴定的终点.
由于抗坏血酸在许多因素影响下都易发生变化,因此,取样品时应尽量减少操作时间,并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化.
对带为颜色的样品液,可用中性的白陶土脱色,吸取澄清滤液进行测定
二、药品与器材
番茄（青色、红色）,辣椒、甘蓝、洋葱、柑橘、蜜枣、鲜枣、柿子、苹果等.
抗坏血酸（纯）,2.6―二氯靛酚钠盐,2%草酸,白陶土.
微量滴定管,100ml容量瓶,10ml移液管,烧杯,研钵（或打碎机）,铝盒,漏斗,分析天平,离心机.
三、操作与步骤
1.试剂制备
（1）标准抗坏血酸溶液：精确称取抗坏血酸50mg（±0.1毫克）,用2%草酸溶解,小心地移入250ml容量瓶中,并加草酸稀释至刻度,算出每毫升溶液中抗坏血酸的毫克数.
（2）2.6―二氯靛酚溶液标定.称取2.6―二氯靛酚钠盐50mg,溶于50ml热水中,冷后加水稀释至250ml,过滤后盛于棕色药瓶内,保存在冰箱中,同时用刚配好的标准抗坏血酸标定.
吸取标准抗坏血酸溶液2ml,加2%草酸5ml,以2.6―二氯靛酚染料溶液滴定,至桃红色15秒钟不褪即为终点,根据已知标准抗坏血酸和染料的用量,计算出每1毫升染料溶液相当的抗坏血酸毫克数.
2.样品液的准备与测定
称取切碎的果蔬样品20g（或蜜枣5g）,放在研钵中加2%草酸溶液少许研碎（或称取100g±0.1g样品加2%草酸100g倒入打碎机中打成浆,然后称取40g）,注入200ml容量瓶中,加2%草酸溶液稀释至刻度,过滤备用.如果滤液有颜色,在滴定时不易辨别终点,可先用白陶土脱色,过滤或用离心机沉淀备用.
吸取滤液10毫升与烧杯中,用已标定过的2.6―二氯靛酚钠盐溶液滴定,至桃红色15秒不褪为止,记下染料的用量.
吸取2%草酸溶液10ml,用染料作空白滴定记下用量.
计算公式：
(V-V1) X A b
W = ―――――――― X — X 100
B a
W = 100克样品含的抗坏血酸毫克数.
V = 滴定样品所用的染料毫升数.
V1 = 空白滴定所用的染料毫升数.
A = 1毫升染料溶液相当的抗坏血酸毫克数.
B = 滴定时吸取的样品溶液毫升数.
b = 样品液稀释后总毫升数.
a = 样品的克数.
附注：经过熏硫或亚硫酸及其盐类处理的样品,在配置样品液时,应加甲醛（纯）5毫升以除去二氧化硫的影响,以后再定容量.
四、结果与计算
1.将测定的数据填入下列表中
（1）染料的标定
标准抗坏血酸溶液的浓度（mg/ml）滴定时所消耗的染料溶液（ml）每1毫升染料溶液所相当的抗坏血酸（mg）第一次第二次第三次平均
（2）样品中抗坏血酸含量的计算
样品名称样品数量（g）样品液的总体积（ml）滴定时所用样品液的量（ml）滴定样品所用染料量（ml）空白滴定所用染料量（ml）维生素C含量（mg/100g）123平均1234
2.列出计算式并计算结果
数据就没办法给你啦,哈哈

❹ 维生素c的化学鉴别方法有哪些

取维生素C 0.2g，加水10ml溶解后分成二等分，一份中加硝酸银试液0.5ml，即生成银的黑色沉淀。另一份加二氯靛酚钠试液1～2滴，该试液的颜色即消失。

❺ 维生素C与2,6-二氯酚靛酚在碱性条件下呈什么颜色,滴定终点是什么颜色

氧化型的2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈红色,在中性或碱性溶液中呈蓝色.所以,当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时,在抗坏血酸全部被氧化后,再滴下的2,6-二氯酚靛酚将立即使溶液呈淡红色,从而显示到达滴定终点.

❻ 维生素C原料药物质量分析实验所需的仪器，试剂，实验步骤和注意事项

仪器设备：溶点仪、自动旋光仪、付立叶红外变换光谱仪、分析天平、紫外分光光度计、原子吸收分光光度计、箱式电阻炉
试剂及试药：硝酸银、二氯靛酚钠试液、硫酸、硫酸铁铵、硝酸、硫酸铜、醋酸、淀粉、碘、硫代乙酰胺
项目：
1、本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭；味酸；久置色渐变微黄，水溶液显酸性反应。本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。
2、熔点：本品的熔点测定为190-192℃，熔融时同时分解。
3、比旋度：取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含0.10g的溶液，比旋度为+20.5°至+21.5°。
3鉴别
3.1取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份，在一份中加硝酸银试液0.5ml，即生成银的黑色沉淀；在另一份中加二氯靛酚钠试液1-2滴，试液的颜色即消失。
3.2本品的红外光吸收图谱与对照的图谱一致。
4检查
4.1溶液的澄清度与颜色：
取本品3.0g，加水15ml，振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照分光光度法，在420nm波长处测定吸收度，不得过0.03。
4.2草酸：取本品0.25g，加水4.5ml，振摇使维生素C溶解，加氢氧化钠试液0.5ml、稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml与氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为对照溶液。供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0.3%）。
4.3炽灼残渣：
取本品，炽灼残渣不得过0.1%。
4.4铁：
取本品5.0g两份，分别置250ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法在248.3nm的波长处测定，应符合规定。
4.5铜：
取本品2.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铜溶液（精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收光度法在324.8nm波长处分别测定，应符合规定。
4.6重金属：
取本品1g，加盐酸液（1mol/L）4ml与水适量溶解成25ml，作为供试品溶液，加入硫代乙酰胺试液；另取标准铅溶液1.0ml同法操作，俩管比较样品管颜色应浅于对照管。（含重金属不得过百万分之十）。
4.7细菌内毒素：取本品，加在，在碳酸钠（170℃加热4小时以上）适量，使混合，依法检查，每1mg维生素C中含内毒素的量小于0.020eu（供注射用）。
5含量测定：
取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，
加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色，并在
30秒钟内不褪。每1ml含碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。
计算公式
V•F×8.806×10-3
%=——————————×100%
W
V：消耗碘滴定液（0.05mol/L）的体积（ml）
F：碘滴定液（0.05mol/L）的浓度校正值
W：样品称量数（g）

❼ 维生素c的检验方法

维生素C 药典2005

拼音名：Weishengsu C

英文名：Vitamin C

【性状】 本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄；水溶液显酸性反应。 本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。

熔点 本品的熔点（附录Ⅵ C）为190-192℃．熔融时同 时分解。

比旋度 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.10g的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度为+20.5°至+21.5°。

【鉴别】 （1）取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份，在一份中加硝酸银试液0.5ml即生成银的黑色沉淀。在另一份中，加二氯靛酚钠试液1-2滴，试液的颜色即消失。
（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集450图）一致。

【检查】 溶液的澄清度与颜色 取本品3.0g，加水15ml，振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在420nm的波长处测定吸光度，不得过0.03。

炽灼残渣 不得过0.1％（附录Ⅷ N）。

铁 取本品5.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵863mg．置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度．摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度．摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（附录Ⅳ D）．在248.3nm的波长处分别测定，应符合规定。

铜 取本品2.0g两份，分别置25ml量瓶中．一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铜溶液（精密称取硫酸铜393mg．置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（附录Ⅳ D），在324.8nm的波长处分别测定，应符合规定。

重金属 取本品1.0g，加水溶解成25ml，依法检查（附录Ⅷ H第一法），含重金属不得过百万分之十。

细菌内毒素 取本品，加碳酸钠（170℃加热4小时以上）适量，使混合，依法检查（附录Ⅺ E），每1mg维生素C中含内毒素的量应小于0.02EU（供注射用）。

【含量测定】 取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并在30秒钟内不 褪。每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。

【贮藏】 遮光，密封保存。

【制剂】 （1）维生素C片（2）维生素C泡腾片（3）维生素C泡腾颗粒（4）维生素C注射液（5）维生素C颗粒

【化学成分】 本品为L-抗坏血酸。含C6H8O6不得少于99.0％。

【类别】 维生素类药

❽ 高效液相色谱法测定维生素c的含量为什么用棕色瓶容量瓶

1.滴定法测定维生素C
1.1测定原理
2，6一二氯靛酚法和碘量法是较常见的滴定测定维生素C的方法。还原型抗坏血酸还原染料2，6一二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6一二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2， 6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
碘量法的原理：维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。
1.2测定操作
2，6一二氯靛酚法：取适量的样品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，制成匀浆。取同一样品匀浆10g，加入1%草酸溶液20 mL，摇匀，用滤纸过滤，取5mL过滤液于锥形瓶中，用2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定(1 mL≈0.02 mgVitC)，以淡红色存在30 s内不褪色为滴定终点。记录2，6-二氯酚靛酚钠盐溶液的消耗量，根据结果计算出样品中维生素C含量(mg/100 g)。
碘量法：将果蔬洗净，用纱布拭干其外部所附着的水分，若样品清洁可以不必洗。样品可以先纵切为4~8等份，分别称取20g可是用食部分，置于研钵中加入2% Hcl 15~10ml，研磨至浆状，移于 100ml 容量瓶中，用2% HCl 加至刻度线处，混匀，过滤，记录滤液总体积。样品液的测定: 在50ml 烧杯中，用移液管注入10% KI 溶液0．5ml，0.5% 的淀粉溶液 2ml，样品液 5ml，蒸馏水 2.5ml，用0.001N KIO3 液滴定，要一滴滴加入，并时时摇动烧杯，至微蓝色不褪色为终点( 一分钟不褪为止) 。记录所用 KIO3 液毫升数，计算维生素C含量。
1.3测定方法评价
2，6-二氯酚靛酚滴定法具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰，如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。碘酸钾滴定法较便宜，使用碘酸钾滴定法测定蔬菜中维生素C含量较为简便易行，而2，6一二氯靛酚法相对复杂。总的来说，滴定法操作简便、快速，无须特殊仪器，但在测定深色样品时，准确度和精确度欠佳。
2.荧光法测定维生素C
2.1测定原理
Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的荧光分析法(OPDA)，并被指定为维生素C的经典荧光分析法。在该方法中，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析。孙振艳等[1]提出了一种新的测定维生素C的荧光分析方法。基于维生素C被Cu2+氧化为DHAA，DHAA进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用，通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。
2.2测定操作
荧光分析法(OPDA)的测定方法：称取一定量样品，研磨后用水浸泡，取清液加入适量1%草酸溶液，振摇约3min，加入0.2g已处理好的活性炭再充分振摇约3min后过滤，滤液加于两个25mL比色管再加入5.0mL缓冲溶液,，其中一管加入2.0mL硼酸溶液(即空白)摇匀，放置15min后，两管均加入邻苯二胺溶液10mL，避光放置30min待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。
孙振艳等的荧光分析法：在25 mL比色管中依次加入0. 6 mL CuSO4溶液，2. 0 mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，2. 0 mL苯甲酸溶液，一定体积的维生素C标准溶液，，5. 0 mLNaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，用蒸馏水定容，摇匀。在35℃恒温水浴中加热30 min，将溶液流水冷却至室温，激发波长为308 nm，在发射波长408nm处，测量荧光强度F，以不含维生素C的试剂空白为F0，计算ΔF=F-F。
2.3测定方法评价
荧光分析法测定维生素C具有操作简单，精密度高，检出限低等优点，该法可以应用于水果、蔬菜和药物中维生素C的检测，适于推广。
3.光度分析法测定维生素C
3. 1测定原理
2，4-二硝基苯肼法和钼蓝比色法是常见测定维生素C的一种光度分析法。2，4-二硝基苯肼法的原理是总维生素C包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。钼蓝比色法是测定果蔬中还原型维生素C含量的一种常用方法，因偏磷酸和钼酸铵反应生成的磷钼酸铵经还原型的维生素C还原后生成亮蓝色的络合物，通过分光比色可以测定样品中还原型维生素C的含量。
3.2测定操作
2，4-二硝基苯肼法：取适量的样品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，制成匀浆。取匀浆20 g (含1~2 mg抗坏血酸)置入100 mL容量瓶中，用1%草酸溶液定容，混匀后过滤。取25 mL过滤液放入有2 g活性炭的25 mL比色管中，振摇1 min，过滤。然后取10 mL此氧化提取液，加入10 mL 2%硫脲溶液，混匀。按照GB12392-90中呈色反应方法，用分光光度计进行比色，根据结果计算出样品中抗坏血酸含量。按下式计算样品中Vc的含量:X=c·Vm×F×1001000。
X—样品中总抗坏血酸含量，mg/100g；
c—由标准曲线查得或回归方程算得“样品氧化液”总抗坏血酸的浓度，μg/mL； V—试样用1%草酸溶液定容的体积，mL； F—样品氧化处理过程中稀释倍数； m—试样质量，g。
钼蓝比色法：准确称取 100 g 样品， 加入草酸－EDTA 溶液， 经捣碎后移入 100 mL 容量瓶，定容，过滤，吸取 2 mL 上清液于 50 mL 容量瓶中，加入 1 mL 的偏磷酸－醋酸溶液，5％的硫酸 2．0 mL，摇匀，加入 4 mL 钼酸铵，以去离子水定容至 50 mL，20 min 后测定吸光度。
3.3测定方法评价
钼蓝比色法测定果蔬中还原型维生素C含量数据稳定性、准确性较好，是一种快速、准确、灵敏度高的测定方法，而且不受样液颜色的影响。2，4-二硝基苯肼比色法测定总VitC (还原型和氧化型)，特异性较好，但操作复杂，是我国食品中VitC测定的标准方法，此方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。
4.高效液相色谱法
4.1测定原理
高效液相色谱法是近年来发展起来的一种测定维生素 C 含量的方法，测定维生素 C 含量通常采用 C18柱或 C8柱，由于维生素 C 对紫外光有吸收，故检测器常用紫外检测器。
4.2测定操作
称取维生素C标准样品0.1000 g.转移至100 ml容量瓶中，用双蒸水定容，得到1.0mg·ml-1的维生素C标准溶液。参考Nisperos-Carriedo等的方法。准确称取果肉1.00 g，用5 ml 0.2%偏磷酸冰浴研磨， 10000 g离心15 min，残渣加入4 ml 0.2%偏磷酸再提取，合并上清液，定容至10 ml，经0.45μm滤膜过滤后待测。每个样品重复5次。维生素C在240 nm波长时有最大吸收峰，故以240 nm作为检测波长。以0.2%偏磷酸为流动相。分别吸取标准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8m，l各自定容至10 m，l从中分别吸取10.0μl进样分析，以峰面积(mv)为纵坐标，标样浓度(mg·ml-1)为横坐标，绘制标准溶液曲线，计算线性回归方程的回归系数和截距。将样品溶液分别进样10.0μl进行液相色谱分析，测定维生素C的色谱峰面积，代入标准曲线计算出维生素C含量。
4.3测定方法评价
高效液相色谱法具有高效、快速、稳定、结构准确、操作简便等特点。该法分离时间短，对结构不稳定的维生素C尤为适合，还特别适用于颜色较深的提取液样品的测定，成为近年来较受欢迎的维生素C测定方法。缺点是所用仪器较为昂贵。

❾ 制备维生素c为什么要检查制剂颜色目的是什么意思

Vc的水溶液在高于或低于PH5~6时，受空气、光线和温度的影响，分子中的内酯环可发生水解，并进一步发生脱羧反应生成糠醛聚合成色（此时的共扼双键更多），使溶液颜色加深，此时测得的吸光度变大。所以吸光度大说明试剂被水解得更多，制剂更不稳定。

❿ 请问维生素C的实验原理是什么啊

维生素C是人类营养中最重要维生素之一，缺乏时会产生坏血病。水果、蔬菜是供给人类维生素C的主要来源。通过对维生素C含量的测定，可以了解果品质量的高低，并掌握这一测定方法。利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化剂，可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C，而染料本身被还原成无色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚淀粉立即被还原成无色。当溶液从无色转变成为红色时，即为滴定终点。
1. 样品的处理和提取：

称取4.0克新鲜样品，至研钵中，加5毫升2%草酸，研成匀浆。通过漏斗将样品提取液转移到50毫升量瓶中。残渣再用2%草酸提取2-3次，提取液及残渣一并转入量瓶。2%草酸总量为35毫升，最后以水定容。溶液定容时若泡沫较多，可加几滴乙醇消除泡沫后再定容。摇匀，过滤，滤液备用。

2. 样品的测定：

吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的红色，并在15秒内不消失为止。记录所用滴定液体积。

3. 空白测定：

在另一50毫升三角瓶内，放入35毫升2%草酸，并用1%草酸定溶，摇匀，取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠滴定至终点，记录染料用量。