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福林酚試劑為什麼濃度不一樣

發布時間: 2023-04-04 05:48:07

① 你好,我想問一下購買的福林酚試劑怎麼使用啊 我看著是粉末的,要把它配成溶液,但是他的濃度怎麼控制

購買的是正規游告產家的話,瓶子上應該會有這種福林酚固體粉末猜磨逗相對分子質量的標注的,用你稱取的粉末質量 除以 此相對分子質量 後即得 粉末物質的量(單位mol),再放入穗賣容量瓶中定容至你要的體積(單位L),物質的量 除以 定容的體積 就等於此時 容量瓶中 福林酚試劑的濃度了(mol/L)

② 福林酚比色法原理

原理蛋白質與福林(Folin)-酚試劑反應,產生藍色復合物。作用機理主要是蛋白質中的肽鍵與鹼性銅鹽產生雙縮脲反應,同時也由於蛋白質中存在的酪氨酸與色氨酸同磷鉬酸-磷鎢酸試劑猜昌反應產生顏色。呈色強度與蛋白質含量成正比,是檢測可溶性蛋白質含量最靈敏的經典方法之一。

此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度伍尺。這個方法的優點是靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多,缺點是費時較長,要嚴格控制操作時間,標准曲線也不是嚴格的直線形式,且專一性較差,干擾物質較多。

福林酚比色法注意事項

(1) Folin-酚乙試劑在酸性條件下較穩定,而Folin-酚甲試劑是在鹼性條件下與蛋白質作用生成鹼性的銅-蛋白質溶液。當Folin-酚乙試劑加入後,應迅速搖勻(加一管搖一腔兆高管),使還原反應產生在磷鉬酸-磷鎢酸試劑被破壞之前。

(2) 血清稀釋的倍數應使蛋白質含量在標准曲線范圍之內,若超過此范圍則需將血清酌情稀釋。

③ folin酚試劑法測定蛋白質含量誤差分析

1,蛋白質分子中含有的肽鍵在鹼春派性條件下可以與Cu2+整合形成蛋白質-Cu2+復合扒斗賀物,即發生雙縮脲銷念反應。

2,在一定濃度范圍內,藍色化合物的藍色深淺與蛋白質濃度成正比。故通過測定相應濃度梯度的蛋白質標准溶液吸光度可依其作出標准由線,以此繪制的標准有線和供試品中蛋白質溶液吸光度可求出供試品中蛋白質的含量。

④ 怎麼配2mol/l的福林酚試劑

在2升磨口迴流瓶中,加入100克鎢酸鈉(Na2WO4·2H2O),25克鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O)及700毫升蒸餾水,再加50毫升85%磷酸,100毫升濃鹽酸,充分混合,接上迴流管,以小火迴流10小時,迴流結束時,加入150克 硫 酸 鋰(Li2SO4),50毫升戚橘蒸旅仔頌餾水及數滴液體溴,開口繼續沸騰15分鍾,以便驅除過量的溴。冷卻後溶液呈黃色(如仍呈綠色,須再重復滴加液體溴的步驟)。稀拆鄭釋至1升,過濾,濾液置於棕色試劑瓶中保存。使用時用標准NaOH滴定,酚酞作指示劑,然後適當稀釋,使最終的酸濃度為2mol/l左右。

⑤ 關於:奶茶飲料中茶多酚的檢測——gb/t 21733—2008

對茶葉進行茶多酚定性定量分析檢測
茶多酚因為其獨特的分子結構,有很強的氧化性以及螯合性,所以能很好的清除人體內的自由基,起到抗氧化、抗衰老的效果;同樣也因為其分子結構中的酚羥基,所以茶多酚有很好的螯合性能,能夠與蛋白質,金屬離子相結合.據了解,茶多酚能與20多種離子產生絡合,與其中10多種產生沉澱,再者,絡合產物很多會產生明顯的色澤變化.由於茶多酚是茶葉中重要的品質之一,所以掌握其檢測方法非常重要.由於很多實驗室在受條件限制,僅能用硫酸鈰滴定法和高錳酸鉀滴定法,雖然操作復雜,常需要多次滴定或標定(滴定),但這些方法仍是能定量測定茶多酚的.福林酚氧化法作為GB/T8313-2008與酒石酸鐵比色法(GB/T8313-2002)在定量分析茶多酚的結果上有許多差異,GB/T8313-2002比GB/T8313-2008測得的結果高33%左右.由於福林酚氧化法是2008年新的國標,所以應用此方法進行茶多酚檢測是必要的.茶多酚檢測方法需要統一,這樣才有利於新產品質量的控制和對新品種的選育,才有真正的指導作用
茶多酚類是一類存在於茶葉中的多元酚的混合物.包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等.茶多酚是茶葉中重要品質成分之一,茶多酚的檢測和分析在茶葉理化分析中是十分重要的.茶多酚類也是易被氧化的化合物,定量分析茶多酚的含量一般也是利用其還原性.目前,分析茶逗中檔多酚的方法很多,在一般實驗條件下,都能進行定量分析.常見的分析方法有:GB/T8313-2002(酒石酸鐵比色法)、硫酸鈰滴定法、高錳酸鉀滴定法、GB/T8313-2008方法二(福林酚氧化法).現將幾種茶多酚分析檢測方法作如下比較
酒石酸鐵比色法
准確稱取茶葉磨碎試樣3g,加入450ml沸蒸餾水,在沸水浴中浸提45min,每隔10min搖瓶1次,過濾,用少量沸蒸餾水洗滌殘渣,濾液合並於500ml容量瓶中,冷卻後用蒸餾水定容到刻度,搖勻,准確吸取1ml後加入25ml容量瓶中,加水4ml,酒石酸鐵溶液5ml,用pH7.5的緩沖液定容至刻度,混勻.用10cm比色皿,以試劑空白為參比,於波長540nm處測定吸光度值
酒石酸鐵比色法,是利用茶多酚在一定的pH條件下,酒石酸鐵與茶多酚類物質形成藍紫色或紅紫色的絡合物,在540nm處有最大吸收值,在一定的濃度范圍內,茶多酚含量與吸光值呈線性關系,當吸光度是0.5時,茶多酚濃度為1.957mg/ml,可用分光光度法比色測得茶多酚濃度結果
培答硫酸鈰滴定法
准確稱取茶葉磨碎試樣5g,加入450ml沸蒸餾水,在沸水浴中浸提45min,每隔10min搖瓶1次,過濾,用少量沸蒸餾水洗滌殘渣,濾液合並於500ml容量瓶中,冷卻後用蒸餾水定容到刻度,搖勻.准確吸取10ml茶湯,加入500ml燒杯中,加300ml水稀釋,然後加入5NH2SO410ml和0.1N硫酸鈰25ml,混合均勻,反應1h後,另入鄰菲羅啉-硫酸亞鐵混合指示劑3滴,用0.1N硫酸亞鐵溶液滴定至黃色退去、桔黃色出現為滴定終點.硫酸鈰滴定法是利用過量的硫酸鈰氧化茶多酚,然後用硫酸亞鐵進行反滴定,測定過量的硫酸鈰.消耗掉的硫酸山亂鈰與茶多酚含量成反比,根據生化研究,消耗0.1N的硫酸鈰相當於氧化1.93mg的茶多酚
高錳酸鉀滴定法
准確稱取茶葉磨碎試樣3g,加入450ml沸蒸餾水,在沸水浴中浸提45min,每隔10min搖瓶1次,過濾,用少量沸蒸餾水洗滌殘渣,濾液合並於500ml容量瓶中,冷卻後用蒸餾水定容到刻度,搖勻.准確吸取10ml茶湯於大白瓷皿中,加入靛紅溶液25ml、水750ml,用0.02N高錳酸鉀溶液滴定,終點掌握由藍色變為綠色,最後轉變為淡黃色為止,消耗的高錳酸鉀溶液量為Aml.再另取100ml茶湯於500ml三角瓶中,加精膠液50ml、酸性飽和氯化鈉溶液100ml和高嶺土10.00g,塞緊瓶口,充分搖振2-3分鍾後過濾,吸取25ml濾液於白大瓷皿中,加入靛紅溶液25ml、水750ml,用0.02N高錳酸鉀溶液滴定,終點掌握由藍色變為綠色,最後轉變為淡黃色為止,消耗的高錳酸鉀溶液量為Bml.因1ml1N高錳酸鉀溶液能氧化58.2g茶多酚,再由A減去B值計算,因氧化茶酚而消耗的高錳酸鉀量
福林酚氧化法
稱量茶葉磨碎試樣0.2g(精確到0.1mg)於10ml離心管中,加入在70℃中預熱過的70%的甲醇溶液5ml,用玻璃棒充分攪拌均勻濕潤,立刻移入70℃水浴中,浸提10min(隔5min攪拌一次),浸提後冷卻至室溫,轉入離心機在3500r/min轉速下離心10min,將上清液轉移至10ml的容量瓶,殘渣再用5ml的70%甲醇溶液提取一次,重復以上操作.合並提取液定容至10ml,搖勻,過0.45μl膜,待用(提取液在4℃下可至多保存24h).同時制備濃度分別為10,20,30,40,50μg/ml沒食子酸工作液.然後分別用移液管移取水(空白對照用)、沒食子酸工作液及測試液各1ml分別加入刻度試管中,在各個試管中加入5.0ml福林酚(Folin-Ciocalteu)試劑,反應3-8min內,加入4.0ml7.5%Na2CO3溶液,加水定容至刻度、搖勻.室溫下放置60min.用10cm比色皿、在波長765nm處測定分光光度值.對應標准曲線上沒食子酸濃度即為茶多酚濃度,依此計算出茶多酚含量
茶多酚分析檢測方法反應原理比較
這四種用於分析檢測茶多酚的反應原理比較相似,主要是利用茶多酚的化學性質,試劑與茶多酚發生顯色反應或通過指示劑進行終點滴定
酒石酸鐵比色法,是利用茶多酚類物質能與亞鐵離子形成藍紫色的絡合物,用分光光度計測定
硫酸鈰滴定法是利用過量的硫酸鈰氧化茶多酚,再用亞鐵離子反滴定硫酸鈰,用鄰菲羅啉-硫酸亞鐵混合物作為指示劑,計算出用於氧化茶多酚消耗的硫酸鈰物質的量,從而計算出茶多酚濃度
高錳酸鉀滴定法主要是用高錳酸鉀氧化茶多酚,同時減去未用於氧化茶多酚而消耗的高錳酸鉀量,通過氧化茶多酚用去的高錳酸鉀量可以計算出茶多酚的濃度
福林酚氧化法是利用福林酚試劑氧化茶多酚中的-OH基團並顯藍色,茶多酚的濃度與藍色的深淺呈線性關系,可用分光光度計在765nm測定其光度值
茶多酚分析檢測方法試劑比較
酒石酸鐵比色法所用試劑沒有提到標准物質,也不涉及到試劑的准確濃度,對緩沖液要求較高,常需用pH計調節測定
硫酸鈰滴定法和高錳酸鉀滴定法都涉及到非基準物質的濃度的標定,即需要用基準物質(高純度、組成恆定、性質穩定等)滴定硫酸鈰溶液或高錳酸鉀溶液的濃度.這樣在實驗中大大地增加了工作量,而且由於自身操作等因素,滴定時常很難分辨滴定終點,故而會帶來更多的誤差.尤其在硫酸鈰滴定法中,用於標定硫酸鈰濃度的硫酸亞鐵銨溶液仍需要用高錳酸鉀滴定,而高錳酸鉀仍非基準物質,仍需要一種基準物質標定.這樣,這個檢測分析中,就會很多次的滴定,既費時又費力.在高錳酸鉀滴定法中,第二次滴定中的精膠液和高嶺土具體為何物,有什麼作用尚不可知,也有文獻報道是用蒸餾水加入靛紅進行滴定,來測得未用於氧化茶多酚消耗的高錳酸鉀量,在福林酚氧化法中,需要用沒食子酸作為標准物質,較為准確
茶多酚分析檢測方法使用儀器比較
酒石酸鐵比色法和福林酚氧化法都用到了分光光度計,福林酚氧化法中還用到了離心機,其它都為常規器具和試劑.而硫酸鈰滴定法和高錳酸鉀滴定法只用到了實驗室最為常規的玻璃器具和一些實驗葯品.這樣,在一個簡陋的實驗室中都可以用這兩種方法來進行測定茶多酚的含量了.由於酒石酸鐵比色法早在1987年就定為茶多酚檢測的國家標准,現在條件一般的實驗室都還是分光光度計的.福林酚氧化法中使用離心機,只能在條件較好的實驗室中進行
茶多酚分析檢測方法提取方式比較
酒石酸鐵比色法、硫酸鈰滴定法和高錳酸鉀滴定法三種都在沸水浴上浸提45min得到茶湯,這點與人們飲茶習慣一致,但由於浸提時時間長,溫度高,不利於茶多酚穩定.福林酚氧化法是用70%甲醇在70℃水浴上浸提10min提取茶多酚,時間短、溫度低有利於茶多酚的穩定,但由於是用70%甲醇浸提,甲醇的沸點是64.5℃,這樣常對人造成一定的傷害
茶多酚的分析檢測方法整體比較
蛋白質沉澱法:利用與蛋白質的絡合沉澱特徵檢測茶多酚的含量
金屬離子螯合法:就像GB/T8313-2002茶葉和GB/T21733-2008茶飲料中的檢測方法一樣,利用多酚羥基與鐵離子的螯合變成藍紫色的特性,在540nm出進行檢測
氧化法:高錳酸鉀與茶多酚的氧化滴定,但是這種方法誤差較大,所以目前已經用的很少了
再就是GB/T8313-2008的福林酚法,利用福林酚能將茶多酚氧化然後自己被還原呈藍色的特徵
目前使用的比較多的就是GB/T8313-2002的酒石酸亞鐵法與GB/T8313-2008中的福林酚試劑法!酒石酸亞鐵法作為茶多酚檢測的經典方法在國內被應用了幾十年,採用3.913的經驗系數進行茶多酚的檢測,但是在"食品添加劑茶多酚"的檢測標准中則是以沒食子酸作標准曲線,系數2.78.同樣的茶多酚檢測,為什麼會有不同的系數呢,很多人或許會疑惑?!但實際上3.913的的系數是以茶葉的乙酸乙酯分離物作為標定物質作標准曲線的,因為乙酸乙酯分離物中不僅僅包括了多酚類物質,還包括了一些其他內涵成分,所以檢測結果會偏大,目前主要用於飲料行業中,而2.78的系數則主要用在植物提取物茶多酚領域,其主要區別在於採用的標定物不一致!當然酒石酸亞鐵法也有自身的缺點:茶多酚是一種復合物,並非單一組分,其中包括了兒茶素,黃酮類,花青素等等,不同的組分與鐵離子絡合顏色並非完全一致,所以對於一般成分比較復雜的植物多酚並不適用
再來談談福林酚法:福林酚法主要利用福林酚的強氧化性,與多酚反應變藍,在765nm處進行檢測,當然了,福林酚還用於蛋白質的檢測中,正是因為這點,所以福林酚並不能有效區分茶多酚,一些還原性氨基酸,植物中非多酚類酚性物質,抗壞血酸等等,這也是它的局限性.當然了,我在網上搜索了一些,很多朋友最關注的是兩種方法的檢測結果到底有多大差異,經本人一天的實驗,當然可能有不盡完善之處,兩者差異大概在30%左右,如果以酒石酸亞鐵法採取2.78的系數,則差異不大,究其主要原因,還是在於GB/T8313-2002中標准曲線的製作並非純粹的茶多酚.再者,就GB/T8313-2008中一些問題,我咨詢了標准校訂單位的王盈峰教授,標准中的刻度試管容積為10ml,所以大家在標准曲線的繪制中要注意了
最後,無論是8313-2002還是8313-2008,茶多酚的檢測方法不斷更新,越來越與國際接軌,也為中國茶葉走出去提供了契機,新方法中也還有很多不盡完善之處,還需要茶學工作者在以後的工作中慢慢完善.提醒大家,"盡信書不如無書",真是因為福林酚法有他自身的不足,所以不同的產品還是需要區別對待!GB/T8313-2008標准曲線以及相關數據y=-1.1862+92.0488xug10A0.120203040500.2300.3400.4520.552相關系數0.9998GB/T21733解讀GB/T21733-2008GB/T21733-2008與GB/T8313-2008兩個標准幾乎同時更新,前者作為茶飲料的標准仍然以酒石酸亞鐵法作為檢測方法,而後者作為茶葉的檢測方法則採用福林酚法,如果兩者檢測結果沒有太大的差異,那也就算了,可關鍵是兩者檢測差異極為顯著,所以引起了廣泛的爭議.但是仔細想想也不難理解,茶飲料企業之所以不用福林酚法主要還是存在以下兩點原因:1,福林酚是利用氧化還原反應測定茶多酚的含量,但是在茶飲料中茶多酚與抗壞血酸等抗氧化劑濃度均為幾百PPM,所以這個確實不好判定,這也是福林酚法的局限性;2,如果採用福林酚法檢測原料中茶多酚,檢測結果比較低.再進行灌裝,前後銜接不上,這個不符合飲料企業的利益.前面也說了.3.913是一個經驗系數,所以真正要准確測定茶多酚我們還得用2.78的沒食子酸標准曲線的系數這里就存在一個問題,如果用2.78的系數來做GB/T8313-2002中的茶葉多酚,然後用HPLC測定兒茶素,結果發現兒茶素占茶多酚的比例高達80%以上但是在食品添加劑茶多酚中QB2451-1995,兒茶素占茶多酚含量大概在60%左右同樣是茶葉提取,為什麼會有這樣的差異呢??!!!!!前面我也提到了,茶葉中的多酚類主要包括兒茶素類,花青素類,黃酮類而在這三者中,黃酮類是不能溶於水的或者說水溶性差我們GB/T8313-2002中採用的是水提取,而一般的食品添加劑茶多酚則採用的是乙醇提取前者提取物中不包括黃酮,後者提取物種包括了黃酮,所以兒茶素在茶多酚中的比例就會下降,會有這樣的差異.但是如果茶多酚行業採用水提取,結果就完全不一樣了目前與茶多酚檢測的標准包括QB2451-1995,食品添加劑茶多酚(沒食子酸作標准曲線,然後以酒石酸亞鐵比色法檢測);GB/T8313-2008茶葉多酚檢測標准(沒食子酸作標准曲線,福林酚法);GB/T21733-2008茶飲料標准(傳統的3.913為系數,酒石酸亞鐵比色法).GB/T8313-2008針對茶葉,固然能與國際接軌,利於中國茶葉走出去是件好事
但對於速溶茶企業就不是這么一回事了,以茶葉水提取照說應該依照GB/T8313-2008的檢測方法,但是目標客戶是速溶茶企業,又得遵循GB/T21733-2008的檢測方法,一來一回,數據相差30%左右,沒有參照價值.其實個人還是比較傾向於QB2451-1995的檢測方法,一則與GB/T8313-2008檢測結果相差不大,二來可以兼顧到上下游!當然了,掌握三種不同的檢測方法,原理,數據差異就能夠靈活應用,但是不是所有的企業都有這樣的能力的!所以,有關部門還需要進一步指導,把配套培訓做到位
說實話我沒看懂……希望你看過之後對你有幫助,在整理這篇文章的時候大致上了解了,方法有很多種,標准沒統一。。具體的在我空間裡麵茶產業茶文化現代化裡面有

⑥ 1mol/L福林酚試劑能配置成2mol/L的福林酚試劑嗎

可以。
將溶液體積縮減到原來的一半,只縮減溶劑不縮減溶質。
濃度是分析化學中的一個名詞。含義是以1升溶液中所含溶質的摩爾數表示的濃度。以單位體積里所含溶質的物質的量(摩激和渣爾數)來表示溶液組成的物理量,叫作棚則該溶質的摩爾濃度,又稱該溶質物質的量濃度。溶質含量越多,濃度越大。濃度可以用一定的溶液中溶質的克數、克分子數或克當量數計算。一般用單位溶液所含溶質的重量的百分比來表示明悄。

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