吸痰做葯敏實驗為什麼找不到菌

A. 葯敏試驗的具體操作方法

1葯敏實驗操作步驟:在超潔凈工作台內，先將滅菌好的培養基做好標記，無菌取病料（即：肝臟、心臟組織）一小塊，輕輕在滅菌的培養基上塗布幾下（不要突破培養基），然後用接種環再密集劃線。然後，將制備好的葯敏片分別按標記好的位置貼在培養基的表面。記錄好培養皿的標記及葯敏片的順序。最後，將培養皿放入37℃恆溫箱中培養8—12小時即可。
2葯敏實驗結果觀察:培養好後會發現細菌再培養基上均勻分布，同時會看到葯敏片周圍有不同程度的抑菌圈。抑菌圈越大，說明該雞群對這種葯物越敏感；抑菌圈小或沒有抑菌圈，說明該雞群對這種葯物不敏感或已經產生了耐葯性。若在培養皿中出現一團一團的細菌時說明培養皿中有雜菌感染。

B. 為什麼要做細菌培養，葯敏實驗

引起每個人感染的細菌可能有所不同，而不同的細菌對不同的抗菌葯物敏感性，即便是不同人體感染的是同一種細菌，其對抗菌葯物的敏感性也會不同，因此，臨床上為提高使用抗菌葯物的針對性，盡快控制細菌感染，一般均應採集病人標本進行細菌培養和葯敏試驗。

C. 做葯敏實驗為什麼要有質控菌株

葯敏試驗，需要標准菌株與待測菌同時培養，如果標准菌株表現出的敏感度正常（誤差2mm以內），那麼這次葯敏試驗的結果才是可靠的。同時不同菌株的葯敏試驗要求的質控菌不同。所以准確的葯敏試驗還要先進行菌株的鑒定。

D. 葯敏試驗中為什麼要用幼齡菌作試驗2、葯敏試驗結果是臨床用葯的唯一依據嗎

不是唯一依據，只是葯敏試驗操作比較簡單，結果也很直觀。

E. 葯敏試驗和細菌培養分別是什麼

細菌培養葯敏試驗就是醫生要取病人的標本，比如血液、痰液、尿液等，然後，把這些標本放到培養基培養，等培養出細菌後，再把好多種葯物放到這些細菌的周圍，看看哪種葯物可以抑制或者殺滅這些細菌，說明這種葯物就屬於這種細菌的敏感葯。
當醫生知道哪個葯物對這種細菌效果好了，就用這種葯物治療病人的疾病，肯定效果很好了。

F. 誰能給我個金黃色葡萄球菌葯敏試驗的抑菌圈直徑呀，網課要寫論文，又做不了實驗沒有數值，寫不出報告

可以自己去（微生物前沿）刊物行找這類的文獻，看看別人的文獻里的這類菌的數據

G. 做細菌培養為什麼培養不出來呢

自然界只有1%的微生物被人類培養出來了，遇到個培養不出來的很正常啊。

我不是醫生，但是知道有辦法可以知道你的病菌，其實也很簡單，取你的痰液去做一個16s的DNA文庫，測序，看看其中有哪些致病菌就行了。

只是這樣成本就太高了，醫院也不會提供這樣的服務。

H. 葯紙片擴散法做葯物敏感試驗時，待檢菌液的濃度為什麼必須為0.5麥氏比濁標准

待測菌液的濃度 接種量應該達到麥氏比濁的標准，菌液的濃度可使抑菌環縮小。抑菌圈的大小可反應測試菌對測定葯物的敏感性，並對該葯物對測試菌的最低抑菌濃度呈負相關關系。希望對您有幫助。

I. 葯敏試驗的實驗步驟

普通營養瓊脂培養基：可去生化試劑店購買，做不同細菌的葯敏試驗可選擇不同的培養基，如做大腸桿菌的葯敏試驗可選擇普通營養瓊脂或麥糠凱培養基。做沙門氏菌可選擇血清培養基。
葯敏試紙：購買或自製（詳見實驗准備）
細菌：待做葯敏試驗的細菌
儀器：接種環、酒精燈、打孔器、牛津杯、移液器、滴頭 2.1葯敏片的准備：購買或自製
2.1.1制備方法：取新華1號定性濾紙，用打孔機打成6毫米直徑的圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔乾燥的青黴素空瓶中，瓶口以單層牛皮紙包紮。經15磅15-20分鍾高壓消毒後，放在37℃溫箱或烘箱中數天，使完全乾燥。
2.1.2抗菌葯紙片製作：在上述含有50片紙片的青黴素瓶內加入葯液0.25毫升，並翻動紙片，使各紙片充分浸透葯液，翻動紙片時不能將紙片搗爛。同時在瓶口上記錄葯物名稱，放37℃溫箱內過夜，乾燥後即密蓋，如有條件可真空乾燥。切勿受潮，置陰暗乾燥處存放，有效期3-6個月。
2.2葯液的制備（用於商品葯的試驗）：按商品葯的使用治療量的比例配製葯液；如商品葯百病消按其說明量治療量0.01%飲水，可按這個比例配製葯液，可取10毫克加入10毫升的水中混勻。此稀釋液即為用於做葯敏試驗的葯液。 3.1葯敏片法
3.1.1在「超凈台」中，用經（酒精燈）火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物，以劃線方式將細菌塗布到平皿培養基上。具體方式；用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點塗菌，以每點開始劃線塗菌至平皿的1/2。然後，找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布於平皿。（另：可挑取待試細菌於少量生理鹽水中製成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液塗布於平皿培養基表面。要求塗布均勻緻密，直接懸液法要把菌液濃度用生理鹽水或PBS調到0.5個麥氏標准再塗布均勻。）
3.1.2將鑷子於酒精燈火焰滅菌後略停，取葯敏片貼到平皿培養基表面。為了使葯敏片與培養基緊密相貼，可用鑷子輕按幾下葯敏片。為了使能准確的觀察結果，要求葯敏片能有規律的分布於平皿培養基上；一般可在平皿中央貼一片，外周可等距離貼若乾片（外周一般可貼七片），每種葯敏片的名稱要記住。
3.1.3將平皿培養基置於37℃溫箱中培養24小時後，觀察效果。
3.2牛津杯法
3.2.1在「超凈台」中，用經（酒精燈）火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物，以劃線方式將細菌塗布到平皿培養基上。具體方式；用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點塗菌，以每點開始劃線塗菌至平皿的1/2。然後，找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布於平皿。（另：可挑取待試細菌於少量生理鹽水中製成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液塗布於平皿培養基表面。要求塗布均勻緻密。）
3.2.2以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管（內徑6nm、外徑8nm、高10nm的圓形小管，管的兩端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培養基上，輕輕加壓，使其與培養基接觸無空隙，並在小管處標記各種葯物名稱。每個平板可放4-6支小管。待分鍾後，分別向各小管中滴加一定數量的各種葯液，勿使其外溢。置37℃培養8-18小時，觀察結果。
3.2.3將平皿培養基置於37℃溫箱中培養24小時後，觀察效果。
3.3打孔法：
該法較簡單，成本低，易操作，比較適用於商品葯物的檢測。
3.3.1在「超凈台」中，用經（酒精燈）火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物，以劃線方式將細菌塗布到平皿培養基上。具體方式；用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點塗菌，以每點開始劃線塗菌至平皿的1/2。然後，找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布於平皿。（另：可挑取待試細菌於少量生理鹽水中製成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液塗布於平皿培養基表面。要求塗布均勻緻密。）
3.3.2以無菌操作將滅菌的不銹鋼小管（外徑為4毫米、孔徑與孔距均為3毫米，管的兩端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培養基上打孔，將孔中的培養基用針頭挑出，並以火焰封底，使培養基能充分的與平皿融合（以防葯液滲漏，影響結果）。
3.3.3加樣：按不同葯液加樣，樣品加至滿而不溢為止。
3.3.4將平皿培養基置於37℃溫箱中培養24小時後，觀察效果。

J. 葯敏試驗不做細菌計數可以嗎

不用計數當然可以啊。這是看抑菌圈大小的啊。

3.1 葯敏片法
3.1.1 在「超凈台」中，用經（酒精燈）火焰滅菌的接種環挑取適量細菌培養物，以劃線方式將細菌塗布到平皿培養基上。具體方式；用滅菌接種環取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點塗菌，以每點開始劃線塗菌至平皿的1/2。然後，找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布於平皿。（另：可挑取待試細菌於少量生理鹽水中製成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液塗布於平皿培養基表面。要求塗布均勻緻密）
3.1.2 將鑷子於酒精燈火焰滅菌後略停，取葯敏片貼到平皿培養基表面。為了使葯敏片與培養基緊密相貼，可用鑷子輕按幾下葯敏片。為了使能准確的觀察結果，要求葯敏片能有規律的分布於平皿培養基上；一般可在平皿中央貼一片，外周可等距離貼若乾片（外周一般可貼七片），每種葯敏片的名稱要記住。
3.1.3 將平皿培養基置於37℃溫箱中培養24小時後，觀察效果。