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為什麼反相色譜保留時間變短

發布時間: 2024-11-26 10:48:48

Ⅰ 反相色譜柱怎麼調整洗脫梯度讓保留時間前移

1、提高有機相濃度:增加有機溶劑在洗脫梯度中的比例,可以降低樣品在柱子上的保留時間。因此,可以逐漸提高有機相溶液濃度,觀察峰的形態和相對保留時間變化,找到最佳的流動相參數。
2、增加洗脫梯度的斜率:增加洗脫梯度的斜率可以加速在柱子上的通過速度,從而縮短保留時間。需要注意,斜率也不能過大,否則容易導致色譜峰的扭曲或分離不完全。
3、改變pH值:反相色譜柱的保留時間受樣品的酸鹼性質影響較大,因此,適當調整樣品溶液的pH值可以改變樣品離子性質,從而影響其在柱子上的保留時間。

Ⅱ 液相色譜法中,反向鍵和色譜法,降低流動相的極性,洗出物的保留時間是變短了還是變長了為什麼

變短了。
首先你說的應該是「反相鍵合色譜法」。
其次,洗脫原理類似搶東西,誰的力量大誰能夠搶到手,而在液相色譜中即是流動相與固定鍵合相搶被洗脫物質,是一個溶解-吸附-再解吸-溶解的重復過程。
洗出物溶於流動相中的同時還會與固定鍵合相作用(其作用力類似范德華力之類的),因此當流動相極性變大有機相比例增加時,洗出物與流動相之間的作用力增加,將隨流動相走得更快,因此出峰時間更短。

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