水相比例大为什么保留时间长
① 水是液体,为什么保持这么长的时间与其他水体没什么大规模的交换,这是什么说明
这是因为地球上除了水以外,天然存在的并且大量存在的液体几乎没有。
② hplc 分析时出峰时间靠前怎么办
分离不好的话,可以换长柱子试试,长柱子的柱效高,分离效果好,而且长柱子的出锋时间要比短柱子延后一些。
③ 高校液相色谱分离原理是什么
简单地回答一下,你知道用粉笔吸墨水的原理吗?粉笔相当于色谱柱,墨水相当于被测物质,墨水可以被粉笔吸附,然后再用另外一种吸附性质较小的流动相来冲,利用墨水中不同成分被柱子吸附程度的不同,使吸附性质较小的成分被流动相较快冲走,而吸附性质较强的成分则在流动相的冲击下缓慢前行,利用这个原理将几种不同成分的物质进行分离。 答案补充 在条件(流动相、固定相、温度和压力等)一定,样品浓度很低时(Cs、Cm很小)时,K只取决于组分的性质,而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件,在这种条件下,得到的色谱峰为正常峰;在许多情况下,随着浓度的增大,K减小,这时色谱峰为拖尾峰;而有时随着溶质浓度增大,K也增大,这时色谱峰为前延峰。因此,只有尽可能减少进样量,使组分在柱内浓度降低,K恒定时,才能获得正常峰。
答案补充 在同一色谱条件下,样品中K值大的组分在固定相中滞留时间长,后流出色谱柱;K值小的组分则滞留时间短,先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大,越容易分离,因此混合物中各组分的分配系数不同是色谱分离的前提。
答案补充 在HPLC中,固定相确定后,K主要受流动相的性质影响。实践中主要靠调整流动相的组成配比及pH值,以获得组分间的分配系数差异及适宜的保留时间,达到分离的目的。
容量因子(capacity factor,k)--化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的量之比。因此容量因子也称质量分配系数。
容量因子的物理意义:表示一个组分在固定相中停留的时间(t'R)是不保留组分保留时间(t0)的几倍。k=0时,化合物全部存在于流动相中,在固定相中不保留,t'R=0;k越大,说明固定相对此组分的容量越大,出柱慢,保留时间越长。
容量因子与分配系数的不同点是:K取决于组分、流动相、固定相的性质及温度,而与体积Vs、Vm无关;k除了与性质及温度有关外,还与Vs、Vm有关。由于t'R、t0较Vs、Vm易于测定,所以容量因子比分配系数应用更广泛
不知道我的回答你是还满意。
④ 为何随着流动相中水的比例逐渐增加,被测组分的保留值也增加α值的变化对色谱有什么影响 为什么
水的增加导致流动相极性增大,导致溶质在固定相和流动相间的分配系数差距变小,于是被测组分的保留值增加
⑤ 液相色谱法中,反向键和色谱法,降低流动相的极性,洗出物的保留时间是变短了还是变长了为什么
变短了。
首先你说的应该是“反相键合色谱法”。
其次,洗脱原理类似抢东西,谁的力量大谁能够抢到手,而在液相色谱中即是流动相与固定键合相抢被洗脱物质,是一个溶解-吸附-再解吸-溶解的重复过程。
洗出物溶于流动相中的同时还会与固定键合相作用(其作用力类似范德华力之类的),因此当流动相极性变大有机相比例增加时,洗出物与流动相之间的作用力增加,将随流动相走得更快,因此出峰时间更短。
⑥ 反相高效液相色谱 为什么增加流动相比例会延长保留时间
增加流动相的比例后,流动相的极性变弱了,洗脱能力降低,对要洗脱下来的物质出峰就晚了,所以会延长保留时间。
⑦ 判断正误:在反相HPLC中,若组分保留时间过长,可增加流动相中水的比例,使组分保留时间适当。
错。
反向HPLC中流动相的梯度是极性从大到小,如水——甲醇,甲醇的比例逐渐增大,对小极性的物质洗脱能力逐渐增强。
反向柱中对小极性的物质保留较好,所以后洗脱。若组分保留时间长,则应加大有机相的比例,使之较快洗脱下来。
⑧ 请问甲醇比例大,为什么保留时间变长,流动相是甲醇/磷酸
在50%时压力最大,这是正常情况的。 请问甲醇比例大,为什么保留时间会变长,流动相是甲醇/磷酸? C18可能在50%MEOh:H2O时压力会最大,流速降低,导致保留时间延长,你可以观察流速是否达到要求News(站内联系TA)你说的是反相吧。bingrenxue(站内联系TA)请把具体情况说一下,包括柱子,什么 峰是那样yuner2011(站内联系TA)今天做实验了,问题已解决,谢谢大家!
⑨ 高水相流动相洗脱高极性的物质吗
高水相流动相洗脱高极性的物质
初搞色谱总会纠结在这个极性的问题上,事实上,对于是液相色谱分离来说,影响因素太多,远不只是一个极性问题的,虽然至今世界上也没有通用的理论来准确说明分离机理,但有两点因素是最影响分离的,第一个是物质与流动相的极性,第二个叫洗脱能力,这两点都很重要.
了解这两点,你上面的问题就解决了.虽然说极性与洗脱能力是相关的,但用洗脱能力来理解出峰快与慢以及分离效果,用极性来理解出峰顺序,这样就容易理解了.反相色谱一般使用强度因子来表示,一般极性参数大的,强度因子就小,但甲醇与乙腈比较特殊,极性参数甲醇与乙腈分别为5.1与5.8,强度因子却是甲醇3.0,乙腈3.2.所以说象你上面问的“如果流动相极性偏大,是不是分离效果不好?还有就是如果分离度不好,加大水的比例,延长保留时间,会不会影响到分离效果?”可以这样理解,流动相洗脱能力越强分离越不好.而对于反相色谱来说,只有两相,一相是有机相,而另一相是水相.有机相是强洗脱剂,水是弱洗脱剂.当然有机相中的洗脱能力也是有差别的,按THF,ACN,MEOH顺序.而不要用极性去理解,那样太复杂了.
有机相比例越大,洗脱能力越强,水相比例越大,洗脱能力越弱,但越容易分离.